01 肛周胶带测试

1.从胶带分配器上取下一段透明（非磨砂）胶带。胶带的长度应足够长，可以握住一端而不碰到中间（约 5 厘米）。一次取下几段胶带可能更容易，将它们贴在干净的工作表面边缘并根据需要使用。

2.将老鼠从笼子里抬起，放在笼盖上，抓住它的尾巴。如果动物的健康状况需要，可以在层流柜或生物安全柜中执行此操作。

3.抓住老鼠的尾巴，将其后腿从笼子中抬起。用拇指和食指抓住胶带的末端，然后将胶带的中间部分牢牢地贴在老鼠的会阴上，包括肛周区域几次。应该看到毛发粘附在胶带上，检测才算成功。

4.将老鼠放回笼子里。

5.将一滴矿物油滴在贴有标签的干净玻璃载玻片上，将胶带贴在载玻片上，然后再滴一滴矿物油。用玻璃盖玻片盖住。

6.使用光学显微镜上的 10 倍和 40 倍物镜读取显微镜载玻片。肛周胶带测试最适合检测管状线虫卵，尽管有时也会发现其他寄生虫卵。

02 粪便浮选

1.准备好浮选溶液、平底瓶（药丸瓶或粪便浮选装置，如 Ovatector）、培养皿、盖玻片、载玻片和涂抹器/搅拌棒。浮选溶液（如 Fecasol）的比重应为 1.20-1.30，可以由各种钠盐、糖、硫酸锌制成，也可以从市场上购买。（表 2）

2.从笼子中或从动物身上收集 2-5 个粪便颗粒，放入浮选室。如果粪便非常干燥（无论是由于年龄还是产生粪便的物种），用 500 μl 0.9% 盐水润湿粪便可能会有所帮助。

3.将小瓶放入培养皿中，以防止溶解的粪便溢出到工作表面。添加少量浮选介质，捣碎并彻底搅拌。不应残留大块物质。继续添加浮选介质，直到小瓶边缘上方形成弯月面。

4.将盖玻片放在弯月面上，室温下孵育 15 分钟。寄生虫卵和一些原生动物卵囊将浮到顶部并粘附在盖玻片上。

5.孵育后，掀起并倒置盖玻片。将盖玻片放在玻璃显微镜载玻片上。

6.在光学显微镜下使用 10 倍和 40 倍物镜检查载玻片。

7.虽然这项技术含量低且易于操作，但一般来说，不建议将这项技术用于小鼠或大鼠。一般来说，它更适合产生大量粪便的动物。

03粪便浓缩和离心    

1.组装浮选溶液、离心管、盖玻片、载玻片、涂抹器/搅拌棒和管盖。浮选溶液的比重应为 1.18-1.30，可以由各种钠盐、糖、硫酸锌制成，也可以从市场上购买。（表 2）

2.从笼子或动物身上收集 2-10 个粪便颗粒，放入收集管中。如果粪便非常干燥（无论是由于年龄还是产生粪便的物种），用 500 μl 0.9% 盐水或您正在使用的漂浮溶液润湿粪便可能会有所帮助。

3.将样品与适当的浮选溶液在玻璃离心管内混合。可以使用涡旋器进行机械搅拌来混合样品。如果使用涡旋器，应在管顶部放置卡扣盖以防止溢出和交叉污染。通常，样品在比重为 1.18 的硫酸锌中制备，但也可以另外使用其他溶液（在单独的制备管中）或替代使用。

4.向每根管中加入额外的浮选溶液，使每根管上形成轻微的正弯月面。将塑料盖玻片盖在每个管上，确保与管口完全接触。将管放入离心机。

5.以大约 616-760 RCF 的速度离心 10 分钟。如果在离心过程中盖玻片丢失或损坏，可以将新的盖玻片放在样品管上，然后轻轻倾斜样品管，使弯月面接触新的盖玻片。无需额外离心。

6.从离心管中取出盖玻片，放在贴有标签的干净玻璃显微镜载玻片上。如果使用多种离心溶液来评估一个粪便样本，则可将两个盖玻片放在同一张载玻片上。

7.用碘对载玻片进行染色。这样可以更容易地识别囊肿。

8.使用光学显微镜上的 10 倍和 40 倍物镜检查载玻片。

04直接检查肠道中的蠕虫和原生动物

1.将安乐死的小鼠或大鼠尸体仰卧在干净的解剖板或类似的工作表面上。

2.使用镊子，在生殖器区域处提起腹壁。使用剪刀，小心地从生殖器区域到胸腔底部切开腹壁，去除皮肤和肌肉，露出肠子。从十二指肠（从胃出口开始的肠道部分）开始，一直到降结肠（在肛门处结束的肠道部分，通常包含形成的粪便）取出肠子。

3.将肠子放入100 ml 培养皿中。从安乐死的动物身上收集一部分盲肠和十二指肠并放在解剖板上。纵向切开每段肠子以露出粘膜。

4.用剪刀将剩余的肠子剪成小段。在盘子里加入足够的自来水，刚好没过收集到的组织。

5.将样品混合物在实验室烤箱或孵化器中以 35-40°C 的温度孵育至少 10 分钟。这将释放并暴露腔内蠕虫。在样品孵育期间，执行以下步骤。

6.将两滴 0.9% 盐水并排放在一张标记的载玻片上，以便准备来自两个肠段（十二指肠和盲肠）的样本。

7.对接种环或等效物进行加热灭菌并冷却。

8.刮掉十二指肠粘膜并将刮屑放在载玻片的左侧（最靠近磨砂边缘的一侧）。

9.刮掉盲肠粘膜并将刮下来的部分放在载玻片的右侧。

10.将盖玻片盖在刮屑上。在相差显微镜下使用 40 倍物镜检查准备好的载玻片）；根据需要增加放大倍数以进行识别。如果检测到寄生虫，则根据形态进行识别。

11.此时，培养皿中的物品已准备好进行检查。在解剖显微镜下检查培养皿中的物品。根据需要使用探针或涂抹棒移动培养皿中的物品，以完成彻底检查。如果存在蛲虫，它们会呈现为小而白的毛发状蠕虫。如果存在绦虫，它们会呈现为节段扁平蠕虫（比线状蛲虫大）。

12.如果发现或怀疑有蠕虫，请使用小镊子收集样本。

13.将标本置于贴有标签的干净玻璃载玻片上，在载玻片上滴上一滴石蜡或矿物油，并在标本顶部放上盖玻片。使用光学显微镜上的 10 倍和 40 倍物镜检查载玻片。

01拔毛检查体外寄生虫（胶带测试）

1.从胶带分配器上取下一段透明（非磨砂）胶带。胶带的长度应足够长，可以握住一端而不碰到中间（约 5 厘米）。一次取下几段胶带可能更容易，将它们贴在干净的工作表面边缘并根据需要使用。

2.将小鼠或大鼠从笼子中抬起并放在笼盖上，抓住它的尾巴。如果动物的健康状况需要，请在层流柜或生物安全柜中执行此操作。

3.束缚住小鼠或大鼠。用止血钳抓住毛皮，轻轻拔掉小鼠肩胛区、腹颈区、腋窝区、腹股沟区和背部的毛皮。将毛皮放在胶带上。如果毛发粘附在胶带上，则检测成功。将小鼠或大鼠放回笼子中。

4.将一滴矿物油滴在贴有标签的干净玻璃载玻片上；贴上胶带，然后再滴一滴矿物油。用玻璃盖玻片盖住。

5.在光学显微镜下使用 10 倍和 40 倍物镜读取显微镜载玻片。

6.此项检查最适合检测毛皮螨，例如Radfordia、Myobia和Myocoptes。

02皮肤刮伤

1.准备好以下材料：待测动物、矿物油、载玻片、盖玻片、手术刀和剪刀。如果要在活体动物身上进行此测试，则应在开始前对动物进行麻醉。

2.取样于尾根部附近的背部和头部颞部。或者，也可以刮除皮肤损伤和/或其他部位。

3.用手术刀沿毛发生长的反方向深深刮擦皮肤，以侵蚀表皮。刮擦前修剪毛发可减少载玻片上的视觉障碍（多余的毛发），从而提高筛选灵敏度。

4.将一滴油滴在载玻片上。将带有样品的刀片在载玻片表面擦拭，将样品涂抹在油滴上。如有必要，在载玻片上添加额外的油，并盖上盖玻片。

5.在光学显微镜下使用 10 倍和 40 倍物镜读取显微镜载玻片。

6.皮肤刮片通常用于检测蠕形螨（和皮肤癣菌）。

03直接检查毛皮

1.将安乐死的小鼠或大鼠放在解剖显微镜的舞台上。

2.使用涂抹棒或类似仪器在约 10 倍的放大倍数下检查毛皮的毛发，分开毛发并观察毛干根部。

3.检查头骨区域、眼睛和耳廓之间、耳廓之间、肩胛骨之间、颌下、腹股沟和腋窝区域。或者，也可以检查整个胴体。

4.使用小镊子收集发现的任何外寄生虫或可疑物质。外寄生虫通常看起来像头皮屑或发根或直接在皮肤上的黄色蜡状堆积物。

5.将标本置于干净的玻璃载玻片上，在载玻片上滴一滴石蜡或矿物油，并在标本上盖上盖玻片。在光学显微镜下使用 10 倍和 40 倍物镜检查载玻片。