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小鼠胆管结扎诱导炎症性肝损伤和肝纤维化
来源: XiaLab | 作者:透明乘客 | 发布时间: 2018-02-05 | 3295 次浏览 | 分享到:
肝脏产生胆汁,胆汁是乳化吸收脂肪,消化小肠中的脂质,排泄胆红素和其他代谢产物所必需的。在肝脏中,肝外胆道系统的阻塞会引发胆汁淤积和炎症,导致门静脉周围区域的强烈纤维化反应。因此,外科结扎胆总管并使胆总管完全阻塞已成为引起啮齿动物梗阻性胆汁淤积性损伤的最常用模型,在21 - 28天后可诱导强烈的纤维化反应。

 肝脏产生胆汁,胆汁是乳化吸收脂肪,消化小肠中的脂质,排泄胆红素和其他代谢产物所必需的。在肝脏中,肝外胆道系统的阻塞会引发胆汁淤积和炎症,导致门静脉周围区域的强烈纤维化反应。因此,外科结扎胆总管并使胆总管完全阻塞已成为引起啮齿动物梗阻性胆汁淤积性损伤的最常用模型,在21 - 28天后可诱导强烈的纤维化反应。



胆管结扎手术要点

1 .沿腹部中线切开约2厘米,打开腹腔。

2 .0.9% NaCl溶液浸湿的棉签提起肝脏,使其腹侧紧贴膈肌,找到肺门。
3 .暴露胆管与十二指肠的开口处。

4 .小心地将胆管从门静脉和肝动脉分离出来。
5.在胆管周围放置5 - 0缝合线,并打结固定,确保有效阻塞胆管而不切断胆管。
6.以相同的方式增加第二次结扎,但不要在两个结之间切断胆管。
7.0.9 % NaCl溶液冲洗腹腔,将腹腔内脏放回原位。
8 .缝合腹腔。

9 .3天后可见肝脏功能紊乱,7天后可见门静脉周纤维化,10天可见肝窦周围纤维化。

肝纤维化评分



胆管结扎的流程

小鼠胆管、门静脉和肝动脉的解剖位置

right(rl), left (ll) median (ml) and the caudate (cl) lobes of the liver

胆管结扎21天肝脏坏死和炎性浸润(A对照肝脏组,B胆管结扎组)

肝纤维化的组织学和生化分析。


(A)肝脏胆管结扎(BDL2周,天狼星红(红色胶原纤维)染色,免疫组化分析α-SMA的表达
(B)I型胶原、α- SMAVimentin波形蛋白的表达是公认的肝纤维化标志物。脂质运载蛋白- 2 ( LCN2 )的表达表明与正在进行的纤维形成有关。


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