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小鼠生理生化指标检测
来源:转自公众号XiaLAB | 作者:莱艾特科技 | 发布时间: 2019-08-03 | 19735 次浏览 | 分享到:
实验动物临床生理生化数据对于评估实验动物的器官功能或损伤改变情况起着决定性或提示性作用。很少有出版物或文献提供可靠的生理生化数据的正常参考值和分析方法。本文以实验小鼠为例,介绍了血清、血浆和尿液的生化指标数据检测时取材要求和正常参考值等。

1. 实验小鼠血清取材要求

采血后,立即将血液放入1.5 mL离心管(不需加抗凝剂或防腐剂)。让血液在室温下静置30 - 60分钟。在相对离心力(relative centrifugal force RCF14000g下离心血样10 - 15分钟,用移液管吸取分离血清,并转移到干净的离心管中。可将血清样本在14000 g下再离心2 - 3分钟,以分离任何剩余的红细胞。将分离好的血清转移到干净的离心管中。

2. 实验小鼠血浆取材要求

血液必须在采血时或采血后立即与抗凝血剂充分混合。采血时与抗凝剂混合方法:用于血液收集的无菌1mL注射器可以将1 mL抗凝血剂从小瓶吸入注射器,然后将全部抗凝血剂重新注回小瓶,即在采血前用抗凝血剂“灌注”采血的注射器。采血后与抗凝剂混合方法:向1.5 mL离心管中加入不超过150μL的抗凝剂。在相对离心力14000g下离心血样10 - 15分。用移液管吸取分离的血浆,并转移到干净的离心管中。可将血浆样本在14000 g下再离心2 - 3分钟,以分离任何剩余的红细胞。将分离好的血浆转移到干净的离心管中。

3. 血清与血浆储存要求

大多数生化分析最好的时间是收集后2小时内在室温下进行分析。如果血清或血浆样品不能在收集后2小时内进行处理,可将样品(放在加盖的试管中)放入4℃冰箱中短期储存(1周)或放入20℃或更冷的冰箱中长期储存1周至6个月。但有些指标检测例外,例如氨、乳酸盐和血气分析需要在采集后并在冰浴或4°C立即被分析。胆红素在暴露于直射光时会降解,因此血液用于胆红素分析应该避光(可用铝箔包裹离心管)。检测乳酸脱氢酶建议室温储存。



4. 实验小鼠血液/血浆临床生化指标正常参考值



5. 国内利用全自动生化分析仪检测血液样本

全自动生化分析仪根据光电比色原理来测量血清或血浆中某种特定化学成分的仪器,可以用于大小鼠血液检测,检测肝肾功能、血糖、血脂、电解质等。

检测内容:

大小鼠血常规检测

五分类血球分析(带网质红细胞)

血生化检测

肝功能:(总蛋白(TP),白蛋白(ALB),总胆红素(TBIL),谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),胆碱酯酶(CHE),谷氨酰转肽酶(GGT),直接胆红素(DBIL)

肾功能:肌酐(CRea),尿素(UREA),尿酸(UA) ,尿蛋白(UP)

血脂:甘油三脂(TG),胆固醇(T-CHO),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),游离脂肪酸(NEFA)

离子类:钙(Ca),磷(P),钾(K),钠(Na),氯(CL),血清铁(Fe)

心肌酶类:乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)

糖尿病检测项目:血糖GLU

心血管风险因子:同型半胱氨酸(HCY)

样本要求:血生化送检样本量>100µl (本底为100µl,每个指标需增加15µl);血常规送检样本量>150µl

6. 实验小鼠尿液收集方法及检测指标正常值

参考文献及书籍

1. The Clinical Chemistry of LaboratoryAnimals, 3rd Edition .Edited By David M. Kurtz, Gregory S. Travlos. Edition FirstPublished 18 October 2017. eBook Published 18 October 2017. 1162 pages. eBookISBN 9781420091144.

2. Alemán CL, Más RM, Rodeiro I, Noa M,Hernández C, Menéndez R, Gámez R. Reference database of the main physiologicalparameters in Sprague-Dawley rats from 6 to 32 months. Lab Anim. 1998Oct;32(4):457-66.

3. Boehm O1, Zur B, Koch A, Tran N, FreyenhagenR, Hartmann M, Zacharowski K. Clinical chemistry reference database for Wistarrats and C57/BL6 mice. Biol Chem. 2007 May;388(5):547-54.


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