WB蛋白质印迹(Western Blot),其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
一、样本制备
1. 悬浮细胞:取大约 1×107个细胞,低速离心收集,弃去培养液,加入1ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
2. 贴壁细胞:取大约1×107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
3. 组织:采集新鲜组织(注意:生物体死亡后10分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入-70℃冰箱中保存。
样本量:组织样本,质量大于100mg;细胞样本,细胞数大于1×106;
二、蛋白质抽提
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