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质粒扩增与提取
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质粒扩增与提取

分子蛋白平台
质粒扩增与提取
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  • 平台整体分类查询:分子蛋白平台
  • 分子蛋白平台项目:质粒扩增与提取
商品描述

细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份，通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态，但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上，随着染色体的复制而复制， 并通过细胞分裂传递到后代。质粒已成为目前常用的基因克隆的载体分子，重要的条件是可获得大量纯化的质粒DNA分子。
       质粒扩增是大量获取质粒的一种化学生物学方法，通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌中，然后从大肠杆菌中收获大量质粒的过程。这一实验主要用于获取较多的质粒，质粒扩增需要的源头质粒量非常小，1微克的质粒都已经能够满足扩增的需要，这也使得质粒的使用和赠送变得非常容易。质粒的用途往往是用于转染细胞，通过转染的方式让细胞表达质粒中携带的基因，从而研究该基因对应蛋白的性能。在基础细胞生物学研究中起着非常重要的作用。

       提取质粒DNA的方法有很多种，从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取，从使用仪器上分可分为一般提取和试剂盒方法提取，从具体操作方法分可以分为碱裂解法、煮沸法、牙签法等，各种不同的方法各有其优缺点，根据不同的实验目的可以采用合适的提取方法。